副猪嗜血杆菌病又称格拉泽氏病（Glasser’sdisease）,是由副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis,Hps）引起。该病主要临床表现为体温升高、呼吸困难和关节肿胀，呈现出多发性纤维素性浆膜炎和关节炎。主要感染2周龄到4月龄的猪，尤其是断奶前后更容易发生，发病率一般在10~15%，严重时死亡率可达50%。
一
临床症状
病猪体温升高，食欲不振，精神萎靡，被毛粗乱，呼吸困难，且多呈腹式呼吸，卧地不起，皮肤发红或苍白。当炎症波及关节时，导致腕关节和跗关节肿胀，站立困难，病猪站立时腿发抖，关节腔积液增多。慢性病例多见于保育猪，表现生长发育不良，高烧、咳嗽或呼吸困难，四肢无力或跛行。急性感染后可能留下后遗症，即母猪流产，公猪跛行等。二
剖检变化
病变以胸腔炎症为主，胸膜心包及肺脏表面炎症最为明显。肺脏可见肺间质水肿、黏连，心包积液、粗糙、增厚。脾脏稍大，出血性梗塞，局部脾坏死，含铁血黄素染脾黄。腹膜、心包膜、胸膜、腕关节和跗关节可见浆液性和化脓性纤维性渗出物，在显微镜下观察渗出物，可见纤维蛋白、中性粒细胞和较少量的巨噬细胞。脏器的炎症是由浆液性逐渐发展为纤维素性和化脓性炎症，眼观以覆盖、包裹和粘连的形式出现。三
流行特点
所有猪均易感，但断奶仔猪和保育阶段的幼猪最易感。病猪是主要传染源，其排泄物、分泌物污染环境及饮食可构成循环再传染。本病传播途径较广泛，除了直接接触传染，还可经空气和食入性传染。四
病原学
副猪嗜血杆菌属革兰氏阴性短小杆菌，形态多变，有15个以上血清型，其中我国主要流行4、5、12、13和14型。大量研究表明，不同血清型HPs毒株其毒力和致病力存在差异，其中血清型1、5、10、12、13、14毒力最强，血清型2、4、15为中等毒力，血清型3、6、7、8、9、11毒株感染症状较缓和或无临床表现。副猪嗜血杆菌抵抗外界环境的能力较差，在干燥的环境中很容易死亡，在60℃的干燥环境中，5~20min即可失去活性，该菌在4℃环境条件下可以持续生存7~10天。五
检测诊断标准
表1副猪嗜血杆菌病检测诊断标准（现行）
六
诊断方法
可根据临床症状、剖检变化和流性特点进行初步诊断，准确诊断需结合实验室检测：临床上常采取直接涂片染色镜检，可见革兰氏染色阴性的细小杆菌或球杆菌；无菌采集病死畜胸腹腔积液、心包液、关节液作细菌分离培养，初次培养常用巧克力琼脂培养基。还可以利用PCR和间接血凝等试验方法进行确诊。6.1细菌分离鉴定无菌采集疑似副猪嗜血杆菌感染病死猪的肺脏、心脏、脑等新鲜组织，胸腔、腹腔、心包积液或关节液，抗凝血等样品。无菌蘸取样品划线接种于TSA固体培养基上，37℃培养24h~48h，形成菌落。再挑取针尖大小、圆形、隆起、光滑湿润、无色透明的单个小菌落在TSA固体培养基上进行划线纯培养，37℃培养24h~48h，形成小菌落。随后进行革兰氏染色，见革兰氏阴性短杆状或球杆状小杆菌，以纤细杆状居多，无鞭毛，不形成芽孢。美兰染色呈两极着色特征。6.1.1“卫星生长现象”试验挑取单个菌落划线在无NAD的绵羊鲜血平板上，再挑取金黄色葡萄球菌垂直于水平划线，37℃条件下培养24h~48h后，副猪嗜血杆菌无溶血现象，并具有“卫星生长现象”，且金黄色葡萄球菌周围的副猪嗜血杆菌菌落较大，远离则较小。6.1.2细菌生化鉴定表2生化鉴定试验
6.2分子生物学方法目前有巢式PCR检测、PCR检测、实时荧光PCR、16SrDNA测序等分子生物学诊断方法。通常采集气管分泌物、肺脏、关节液等样品，4℃立即送到实验室进行检测。6.2.1PCR扩增可以通过商品化试剂盒进行核酸的提取，再进行特异性引物靶基因扩增，同时设立阴阳性对照和空白对照。PCR扩增产物通过凝胶电泳，观察、拍照，记录实验结果。当DNA分子质量标准、各组对照同时成立时，被检样品出现同阳性对照位置相同的条带，则判定为阳性。6.2.2实时荧光PCR扩增核酸提取后，可选用商品化试剂盒或自行合成的引物及探针进行目的基因的实时荧光PCR扩增。其敏感度和特异性更优于普通PCR方法。6.3血清学方法琼脂扩散试验、补体结合试验、平板凝集、间接血凝试验、间接免疫荧光、间接ELISA等。6.3.1琼脂免疫扩散试验（AGP）琼脂免疫扩散试验是可溶性抗原与相应抗体特异性结合，两者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下，经过一定的时间，可形成肉眼可见的沉淀物。可用于疾病的诊断，也可进行抗原的分型。该实验操作简便，对环境设备要求低，适合基层使用。6.3.2间接血凝试验（IHA）该方法操作方便，结果肉眼可见，由于特异性较高，作为副猪嗜血杆菌主要的检测和分型方法，能对90%的副猪嗜血杆菌进行分型，包括在免疫扩散试验中不能得到结果或起交叉反应的菌株。6.3.3酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA检测方法敏感性高、稳定性好、操作简便、快速，可用于大批量的抗原或抗体样品的检测，临床应用优于前两者。其包被抗原的选择必须是具有特异性的。建立Hps抗体间接ELISA方法所用的抗原通常为灭活的Hps全菌、Hps菌体超声裂解上清和表达纯化的Hps蛋白（如ompP2、P2和耐热蛋白等）。七
耐药性
有研究表明，副猪嗜血杆菌对氟苯尼考、四环素、阿奇霉素敏感率高，对阿米卡星、头孢拉定、红霉素、氨苄青霉素、强力霉素、庆大霉素和替米考星较敏感，而对阿莫西林和林肯霉素耐药率较高。八
商品化疫苗
目前已有8种具有批准文号的副猪嗜血杆菌商品化灭活疫苗，分别为：表3具有批准文号的副猪嗜血杆菌商品化灭活疫苗一览表商品化副猪嗜血杆菌疫苗会对相同血清型副猪嗜血杆菌产生有效保护，建议养猪场选择使用与本猪场流行菌株一致的疫苗，用于预防副猪嗜血杆菌病的感染。
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